Cele patru metode principale de analiză microbiană includ măsurarea creșterii, numărarea microbilor, indicele fiziologic și microscopia frotiului.
Măsurarea creșterii
Măsurarea volumului: Starea de creștere a microorganismelor este reflectată prin măsurarea cantității de hife dintr-un anumit volum de mediu de cultură. Această metodă este simplă și rapidă, dar eroarea este mare.
Metoda greutății uscate: Greutatea uscată a microorganismelor se determină prin centrifugare sau filtrare. Această metodă este mai greoaie și este de obicei utilizată atunci când produsul microbian este o celulă bacteriană, cum ar fi drojdia uscată, furajele etc.
Turbidimetrie: Valoarea absorbanței la o anumită lungime de undă este măsurată de un spectrofotometru ultraviolet pentru a determina starea de creștere a microorganismelor. Această metodă este utilizată în principal pentru monitorizarea creșterii bacteriene în industria fermentației.
Măsurarea lungimii miceliului: Pentru ciupercile filamentoase și unele actinomicete, lungimea creșterii hifelor într-o anumită perioadă de timp poate fi măsurată pe mediul de cultură.
Metoda de numărare microbiană
Metoda hemocitometrului: simplă, intuitivă și rapidă, dar potrivită numai pentru numărarea sporilor produși de microorganisme unicelulare sau de microorganisme filamentoase, iar rezultatele includ bacterii moarte și vii23.
Metoda de numărare a colorării: Folosiți coloranți precum roșu neutru, albastru tripan și albastru de metil pentru a distinge celulele moarte de celulele vii.
Metoda de diluare a lichidului: Efectuați o diluție în serie de zece ori a probei bacteriene necunoscute, înregistrați numărul de eprubete cu creștere la fiecare diluție după cultură și apoi calculați conținutul de bacterii vii pe baza multiplului de diluție al probei. Această metodă este mai greoaie, dar numărul de bacterii vii poate fi calculat.
Metoda de numărare a coloniilor în plăci: Se împrăștie soluția bacteriană diluată pe un mediu de cultură solid și se calculează numărul de bacterii din soluția bacteriană originală după cultură. Această metodă poate obține informații despre bacteriile vii, dar operațiunea este greoaie și necesită un anumit timp de cultură.
Metoda indicatorului fiziologic
Determinarea conținutului de azot: conținutul de azot al majorității bacteriilor este de 12,5% din greutatea uscată. Starea de creștere a microorganismelor poate fi reflectată indirect prin măsurarea conținutului de azot.
Determinarea conținutului de carbon: Folosiți soluția de K2Cr2O7 pentru a măsura absorbanța la o anumită lungime de undă, trageți o curbă standard pentru a calcula cantitatea de creștere.
Metoda de determinare a zahărului reducător: reflectă starea de creștere a microorganismelor prin măsurarea cantității de zahăr reducător, care este adesea folosit în producția de fermentație industrială la scară largă.
Determinarea altor substanțe fiziologice: Inclusiv acid nucleic, ATP și alte conținuturi, precum și producția de acid, producția de gaz, consumul de oxigen, producția de căldură și alți indicatori.
Microscopia frotiului
Microscopia frotiului este o metodă de examinare a bacteriilor, citologiei, bacteriilor enzimatice, microfilariilor și cristalelor de colesterol. Prin pregătirea frotiurilor și observându-le la microscop, morfologia și structura microorganismelor pot fi înțelese intuitiv
